Vyšetření biologických vzorků na chřipkové viry

V souvislosti s nastupující chřipkovou sezónou informujeme lékaře, že ZÚ Ostrava stejně jako v předchozích sezónách provádí přímou i nepřímou diagnostiku chřipky.

Provádíme vyšetření metodou PCR včetně typizace, kutlivaci virů na tkáňových kulturách a průkaz specifických protilátek.

Materiál na vyšetření chřipky

Pro průkaz protilátek se vyšetřuje srážlivá krev, nejlépe párové vzorky:

1. krev co nejdříve na začátku klinických příznaků,
2. vzorek za 2-3 týdny.

Pro přímou diagnostiku chřipky – PCR a kultivaci – je možno vyšetřit několik typů materiálů:

1. Výtěr z nosohltanu a nosu ve virologickém médiu - správně provedený odběr popsán níže v textu.
2. Nasofaryngeální aspirát – 2-5 ml
3. Bronchoalveolární laváž (BAL) – 2-5 ml
4. Tracheální aspirát nebo aspirát z dolních cest dýchacích (u intubovaných pacientů) - 2-5 ml
5. Sekční materiál (nejčastěji tkáň plic nebo trachea) ve virologickém médiu

Odběrové soupravy pro přímou diagnostiku

Trojobaly na požádání rozesílá centrální příjem materiálu ZÚ : tel.: 596 200 461.

Zkumavky s virologickým médiem, tampony a žádanky rozesílá virologické odd.: tel.: 596 200 316, 344.

Zkumavky s médiem uchovávat zmražené, při teplotě -20°C lze uchovávat až 1 rok. Před použitím se obsah zkumavky nechá rozmrazit při pokojové teplotě a lehce protřepe.

Manuál pro odběr

Výtěr z nosohltanu a nosu deponovaný do virologického média (V) – pro přímý průkaz chřipkových virů (PCR a kultivace)

1. Výtěr z nosohltanu se provede nejlépe ráno nalačno. Pacient by před tím neměl použít kloktadlo ani zubní pastu. Provádí se suchým sterilním dakronovým tamponem na tyčince-držátku z umělé hmoty.
2. Pacienta necháme před odběrem zakašlat. Energicky vytřeme při současné rotaci tamponem zadní stěnu nosohltanu a patrové oblouky tak, aby se zachytilo co nejvíce buněčného materiálu. Tonzilám se při odběru na virologii vyhneme.
3. Tampon s materiálem vložíme do zkumavky s vychlazeným virologickým médiem. Plastové držátko - horní část tyčinky – odlomíme o okraj zkumavky a odložíme. U téhož pacienta provedeme i výtěr nosní sliznice a tampon zalomíme do jedné společné odběrové zkumavky. Zkumavku s tamponem pečlivě uzavřeme zátkou.
4. Otevřeme druhou odběrovou zkumavku s médiem a provedeme ještě jednou výtěr z z krku i nosu a tampony zalomíme do druhé zkumavky. Zkumavku s tamponem pečlivě uzavřeme zátkou. Tím získáme od jednoho pacienta dvě zkumavky s výtěrem.
5. Transport co nejrychleji, materiál by měl být doručen do laboratoře do 24 hodin po odběru. Do doby transportu uchováváme v chladničce při 2-8°C. Transport v trojobalu s chladítkem nebo tajícím ledem (do igelit.sáčku vložíme několik kostek ledu, uzavřeme gumičkou a přidáme do trojobalu k materiálu).

Poznámky

Je vhodné také pacientovi odebrat vzorek srážlivé krve na vyšetření protilátek proti respiračním virům.

Materiál zaslat společně s řádně vyplněnou žádankou, na žádanku nutno uvést datum odběru.

Vyšetření metodou PCR se provádí každý pracovní den, výsledek je znám zpravidla do druhého dne po dodání vzorku do laboratoře.

Metodou PCR se vzorek vyšetří nejprve na chřipku A a chřipku B, v případě pozitivity chřipky A se dále provádí typizace.

Kultivace virů na tkáňových kulturách se provádí u vzorků pozitivních v PCR nebo na vyžádání, vykultivované kmeny chřipkových virů se zasílají do NRL pro chřipku (SZÚ Praha).

Vyšetření protilátek proti respiračním virům se provádí zpravidla 2x týdně (út-čt).